Curso de Imuno-Histoquímica

Aula 1 • Arquitetura Tecidual e Biologia Celular

Revisa organelas celulares, matriz extracelular e organização tecidual. Contextualiza onde os antígenos-alvo residem dentro das seções de tecido.

Aula 2 • Fundamentos da Interação Antígeno-Anticorpo

Aborda estrutura do epítopo, classes de anticorpos e afinidade de ligação. Fornece a lógica molecular para cada escolha subsequente de reagente de IHC.

Aula 3 • Segurança Laboratorial e Conformidade Regulatória

Aborda riscos químicos, níveis de biossegurança e descarte de resíduos. Garante que os alunos operem dentro dos padrões de segurança e qualidade aplicáveis.

Aula 1 • Preparação de Secções Congeladas e Criostato

Apresenta congelamento rápido, operação de criostato e montagem de seções congeladas. Seções congeladas preservam antígenos lábeis perdidos durante o processamento em parafina.

Aula 2 • Química e Métodos de Fixação

Explica reticulação por aldeído, fixadores coagulantes e cinética de fixação. A escolha do fixador determina diretamente a preservação do antígeno e as necessidades de recuperação.

Aula 3 • Processamento e Inclusão em Parafina

Ensina as etapas de desidratação, diafanização, infiltração e inclusão em parafina. O processamento adequado mantém a morfologia e a integridade antigênica para a microtomia.

Aula 4 • Avaliação da Qualidade do Tecido Processado

Avalia a morfologia da hematoxilina e eosina como um indicador da prontidão para IHC. Identifica artefatos de processamento que comprometem a qualidade da coloração.

Aula 1 • Solução de Problemas na Microtomia

Identifica artefatos de vibração, compressão e rasgamento e suas causas. A solução sistemática de problemas reduz o desperdício de tecido e reagentes.

Aula 2 • Operação do Micrótomo Rotativo

Aborda tipos de lâminas, alinhamento do porta-bloco e mecânica do corte. A configuração correta do micrótomo é pré-requisito para obter secções em fita.

Aula 3 • Montagem e Adesão da Secção

Ensina revestimento da lâmina, temperatura do banho-maria e protocolos de secagem. A adesão adequada previne a perda da seção durante as etapas aquosas de IHC.

Aula 1 • Recuperação Antigênica Enzimática

Ensina a recuperação baseada em protease usando proteinase K, tripsina e pepsina. A concentração da enzima e o tempo de incubação requerem titulação cuidadosa por anticorpo.

Aula 2 • Recuperação de Epítopos Induzida por Calor

Aborda composição do tampão, pH, temperatura e dispositivos de aquecimento para HIER. O pH e a temperatura são as principais variáveis que controlam a eficiência da recuperação.

Aula 3 • Otimização e Validação da Recuperação

Aplica uma abordagem matricial sistemática para identificar condições ideais de recuperação. Condições de recuperação validadas são documentadas para uso rotineiro reprodutível.

Aula 1 • Estratégias de Validação de Anticorpos

Aplica abordagens de validação genética, ortogonal e baseada em expressão. A evidência de validação deve demonstrar especificidade antes do uso clínico ou de pesquisa.

Aula 2 • Armazenamento e Controle de Qualidade de Anticorpos

Aborda aliquotagem, ciclos de congelamento e descongelamento e testes de estabilidade para anticorpos. O armazenamento inadequado degrada o desempenho do anticorpo e introduz variabilidade entre lotes.

Aula 3 • Anticorpo Secundário e Reagentes de Detecção

Aborda a correspondência de espécie do anticorpo secundário, tipos de conjugado e sistemas de polímero. Secundários incompatíveis produzem sinais falsos que invalidam os resultados.

Aula 4 • Características do Anticorpo Primário

Examina a seleção do clone, espécie hospedeira e especificidade ao alvo para anticorpos primários. As escolhas de clone e espécie determinam a reatividade cruzada e a compatibilidade com o sistema de detecção.

Aula 1 • Bloqueio de Interferências Endógenas

Ensina etapas de bloqueio de peroxidase, bloqueio de biotina e bloqueio com soro. O bloqueio elimina o fundo inespecífico que obscurece o sinal verdadeiro.

Aula 2 • Aplicação de Cromógeno e Contracoloração

Aplica DAB, AEC e outros cromógenos com tempos de desenvolvimento controlados. A contracoloração com hematoxilina fornece contexto morfológico para a interpretação.

Aula 3 • Desparafinização e Reidratação

Aborda o uso de substitutos do xilol, álcoois graduados e etapas de equilíbrio com tampão. A desparafinização completa é essencial para a penetração uniforme dos reagentes.

Aula 4 • Incubação com Anticorpo Primário e Secundário

Otimiza a diluição do anticorpo, tempo de incubação, temperatura e uso da câmara úmida. Condições de incubação consistentes são críticas para a intensidade de coloração reprodutível.

Aula 1 • Ação Corretiva e Preventiva

Aplica a metodologia CAPA a falhas de IHC e documenta as resoluções. Ações preventivas reduzem a recorrência e apoiam a melhoria contínua da qualidade.

Aula 2 • Seleção e Uso de Tecido de Controle

Define controles positivo, negativo e interno e seu posicionamento em cada corrida. Controles apropriados são a principal salvaguarda contra resultados falsos.

Aula 3 • Reconhecimento e Diagnóstico de Falhas de Coloração

Cataloga padrões de falha de ausência de sinal, sinal fraco e fundo alto com causas raiz. O diagnóstico sistemático previne falhas repetidas e desperdício de reagentes.

Aula 4 • Ensaio de Proficiência e Avaliação Externa da Qualidade

Participa de programas de avaliação externa da qualidade para comparar o desempenho laboratorial. Os resultados de EQA impulsionam a melhoria direcionada na coloração e interpretação.

Aula 1 • Distinguindo Sinal Verdadeiro de Artefato

Diferencia coloração específica de artefatos de borda, esmagamento e necrose. O reconhecimento de artefato previne a classificação incorreta de casos negativos como positivos.

Aula 2 • Redação e Comunicação do Laudo de IHC

Estrutura laudos de IHC com declarações claras de resultados, comentários interpretativos e ressalvas. Os laudos devem transmitir informações acionáveis para clínicos e equipes multidisciplinares.

Aula 3 • Princípios da Avaliação de Lâminas de IHC

Estabelece uma abordagem estruturada para avaliar padrão, intensidade e distribuição da coloração. A avaliação sistemática reduz a variabilidade interobservador na prática rotineira.

Aula 4 • Integração da IHC com o Contexto Clínico

Correlaciona achados de IHC com morfologia, histórico clínico e dados moleculares. A integração evita a dependência excessiva apenas da IHC e melhora a exatidão diagnóstica.