Curso de Diagnóstico por PCR

Aula 1 • Descarte de Resíduos Químicos e Biológicos

Abrange segregação, identificação e descarte de reagentes de PCR e espécimes biológicos. Conecta o manejo adequado de resíduos à conformidade regulatória e à proteção ambiental.

Aula 2 • Protocolos de Equipamentos de Proteção Individual

Detalha a colocação, remoção e descarte corretos de luvas, aventais, máscaras e proteção ocular. Reforça a prevenção de contaminação como pré-requisito para resultados válidos de PCR.

Aula 3 • Níveis de Biossegurança e Classificação de Risco

Define os níveis de biossegurança e mapeia os grupos de risco de patógenos para os requisitos de contenção apropriados. Fornece a base de segurança para todas as atividades laboratoriais subsequentes.

Aula 1 • Principais Reagentes Analíticos

Identifica os componentes essenciais da PCR, incluindo DNA polimerase, iniciadores, dNTPs e tampão. Os alunos aprendem como cada reagente contribui para a fidelidade e o rendimento da reação.

Aula 2 • Visão Geral das Variantes e Aplicações da PCR

Examina os principais formatos de PCR, incluindo RT-PCR, qPCR e PCR multiplex. Posiciona cada variante em seu contexto diagnóstico ou de pesquisa para capítulos posteriores.

Aula 3 • Fundamentos da Estrutura e Replicação do DNA

Abrange a composição de nucleotídeos, o pareamento de bases e o modelo de dupla hélice como pré-requisitos para a lógica da PCR. Estabelece o vocabulário molecular usado em todo o capítulo.

Aula 1 • Recebimento de Espécimes e Processamento Pré-Analítico

Detalha os procedimentos de recebimento laboratorial, incluindo inspeção visual, critérios de rejeição e registro. Conecta as etapas pré-analíticas à qualidade da extração e amplificação posteriores.

Aula 2 • Transporte de Espécimes e Cadeia de Frio

Abrange os requisitos de temperatura, padrões de embalagem e prazos de transporte para espécimes de PCR. Mantém a qualidade pré-analítica que afeta diretamente o desempenho da amplificação a jusante.

Aula 3 • Tipos de Espécimes e Locais de Coleta

Descreve espécimes nasofaríngeos, orofaríngeos, salivares e outros tipos usados no diagnóstico por PCR. Explica como o local da coleta afeta a carga viral e a exatidão do resultado.

Aula 1 • Avaliação da Qualidade do Ácido Nucleico

Ensina a quantificação espectrofotométrica e fluorométrica do ácido nucleico extraído. As métricas de qualidade orientam as decisões de diluição e preveem a eficiência da amplificação por PCR.

Aula 2 • Princípios da Extração de Ácido Nucleico

Explica a lise celular, ligação do ácido nucleico, lavagem e eluição como etapas universais de extração. Estabelece a estrutura conceitual aplicada a todos os métodos manuais e automatizados.

Aula 3 • Solução de Problemas na Extração

Identifica falhas comuns de extração, incluindo baixo rendimento, degradação e inibição. A solução sistemática de problemas restaura o desempenho da extração e protege a validade dos resultados.

Aula 4 • Plataformas de Extração Automatizadas

Apresenta extratores automatizados de alto rendimento, sua programação e requisitos de manutenção. A automação reduz o erro manual e aumenta o rendimento para testes de PCR de alto volume.

Aula 1 • Programação e Operação do Termociclador

Detalha como programar parâmetros do ciclo, incluindo temperatura, tempo e taxas de rampa. A programação correta determina diretamente a eficiência da amplificação e a especificidade do produto.

Aula 2 • Preparação dos Componentes da Reação

Abrange os procedimentos de descongelamento, vórtex e centrifugação de reagentes antes da montagem do master mix. A preparação adequada previne erros de pipetagem e garante condições de reação consistentes.

Aula 3 • Técnicas de Carregamento de Placas e Tubos

Abrange o layout sistemático de amostras, o posicionamento de controles positivo e negativo e os métodos de vedação. O carregamento organizado previne contaminação cruzada e apoia a interpretação precisa dos dados.

Aula 4 • Monitoramento e Conclusão da Corrida

Ensina o monitoramento em tempo real das curvas de amplificação e alertas do instrumento durante uma corrida. A intervenção oportuna durante uma corrida evita o desperdício de reagentes e resultados inválidos.

Aula 1 • Compreendendo os Valores de Ct e as Curvas de Amplificação

Explica os valores de ciclo limiar, as fases da curva sigmoide e sua relação com a quantidade do alvo. A interpretação do Ct é a principal habilidade para determinar resultados positivos, negativos e indeterminados.

Aula 2 • Geração de Laudos e Comunicação de Resultados

Ensina a formatação estruturada de laudos, a codificação de resultados e a transmissão segura aos médicos solicitantes. A emissão precisa de laudos fecha o ciclo diagnóstico e apoia a tomada de decisão clínica.

Aula 3 • Avaliação do Desempenho dos Controles

Abrange a interpretação dos controles positivo, negativo e de extração interna dentro de cada corrida. Falhas nos controles invalidam a corrida e acionam fluxos de trabalho de ação corretiva definidos.

Aula 4 • Chamadas Positivas, Negativas e Indeterminadas

Define as categorias de resultados usando critérios de corte específicos do ensaio e o desempenho dos controles. Os alunos aplicam regras de decisão de forma consistente para minimizar erros de classificação.

Aula 1 • Não Conformidade e Análise de Causa Raiz

Abrange a identificação, documentação e resolução de eventos não conformes em testes de PCR. A análise de causa raiz previne a recorrência e demonstra melhoria contínua aos acreditadores.

Aula 2 • Projetando um Plano de CQ para PCR

Orienta os alunos na seleção de materiais de controle, definição de critérios de aceitação e programação de corridas de CQ. Um plano de CQ estruturado detecta erros sistemáticos antes que eles afetem os resultados dos pacientes.

Aula 3 • Gráficos de Levey-Jennings e Análise de Tendências

Ensina a construção e interpretação de gráficos de Levey-Jennings para detectar desvios e tendências. A análise visual de tendências permite a detecção precoce de degradação de reagentes ou deriva do instrumento.

Aula 4 • Fundamentos do Controle de Qualidade

Define exatidão, precisão analítica, sensibilidade analítica e especificidade analítica como métricas centrais de controle de qualidade para ensaios de PCR. Essas métricas formam a base para avaliar o desempenho do ensaio em todas as atividades de CQ subsequentes.

Aula 1 • Validação e Verificação de Ensaios

Abrange parâmetros de validação de métodos, incluindo exatidão, precisão e teste de interferência. Os dados de validação demonstram a aptidão do ensaio para uso clínico e satisfazem os requisitos de submissão regulatória.

Aula 2 • Otimização da PCR Quantitativa em Tempo Real

Abrange a construção da curva padrão, cálculo da eficiência e avaliação da faixa dinâmica para qPCR. A qPCR otimizada fornece quantificação exata essencial para o monitoramento da carga viral.

Aula 3 • Estrutura Sistemática para Solução de Problemas em PCR

Fornece uma abordagem estruturada para diagnosticar falsos positivos, falsos negativos e inibição. A solução sistemática de problemas reduz o tempo de resolução e protege a exatidão diagnóstica.

Aula 4 • Princípios e Aplicações da PCR Digital

Apresenta a PCR digital baseada em gotículas e chip para quantificação absoluta sem curva padrão. A PCR digital é aplicada a alvos de baixa abundância e detecção de variantes raras.