Napredni tečaj plinske kromatografije (GC)

Uč lekcija 1 • Izbira nosilnega plina in nadzor pretoka

Pojasnjuje, kako vrsta plina in hitrost pretoka vplivata na učinkovitost in združljivost z detektorjem. Študenti izberejo ustrezne nosilne pline za običajne analizne scenarije.

Uč lekcija 2 • Pregled arhitekture GK instrumenta

Prikazuje vsak sklop strojne opreme – dovod nosilnega plina, injektor, peč za kolono, detektor in podatkovni sistem. Vzpostavlja izrazoslovje, ki se uporablja v celotnem tečaju.

Uč lekcija 3 • Principi kromatografskega ločevanja

Obravnava porazdeljevanje, zadrževanje in selektivnost kot fizikalno osnovo ločevanja v GK. Povezuje termodinamično teorijo s praktičnimi odločitvami o koloni in nosilnem plinu, ki sledijo.

Uč lekcija 4 • Osnove kemije stacionarnih faz

Predstavi polarnost, funkcionalne skupine in selektivnost faz kot gonilnike zadrževanja analitov. Zagotavlja osnovo za izbiro kolone, obravnavano v 2. poglavju.

Uč lekcija 1 • Izbira prave stacionarne faze

Uporablja koncepte polarnosti in selektivnosti za prilagoditev kemije faze ciljnim analitom. Zajema industrijsko standardne faze za hlapne, polhlapne in specialne aplikacije.

Uč lekcija 2 • Prenos metode med formati kolon

Uči zaklepanje retencijskega časa in ujemanje linearne hitrosti za prenos metod med dimenzijami kolon. Zagotavlja analitično enakovrednost ob zamenjavi ali nadgradnji kolon.

Uč lekcija 3 • Dimenzije kolon in njihovi učinki

Kvantificira, kako dolžina, notranji premer in debelina filma vplivajo na kompromis med učinkovitostjo, kapaciteto in hitrostjo. Povezuje Van Deemterjevo teorijo iz 1. poglavja z odločitvami o strojni opremi.

Uč lekcija 4 • Izotermni proti temperaturno programiranim analizam

Primerja delovanje pri stalni in temperaturno programirani temperaturi za različne stopnje kompleksnosti vzorcev. Študenti načrtujejo programe, ki uravnotežijo čas analize z ločljivostjo vrhov.

Uč lekcija 1 • Injiciranje na kolono in PTV injiciranje

Zajema direktno injiciranje na kolono in temperaturno programirano uparjanje za termolabilne ali visokovrele analite. Razširja zmožnosti injiciranja preko standardnih split/splitless načinov.

Uč lekcija 2 • Osnove split in splitless injiciranja

Pojasnjuje razmerje delitve, zasnovo vložka in čas izpihovanja kot kontrole občutljivosti in oblike vrha. To sta najpogosteje uporabljena načina injiciranja v rutinskem GK delu.

Uč lekcija 3 • Priprava vzorcev za GK analizo

Obravnava ekstrakcijo tekoče-tekoče, ekstrakcijo na trdni fazi in pristope "razredči-in-analiziraj" kot predhodne korake. Pravilna priprava zmanjša motnje matrike in zaščiti kolono ter injektor.

Uč lekcija 4 • Tehnike headspace in SPME

Predstavi statični headspace in mikroekstrakcijo na trdni fazi kot načina vnosa vzorca brez topila. Idealno za hlapne analite v kompleksnih matrikah, kot so živila ali biološki vzorci.

Uč lekcija 1 • Osnove GK-MS detektorja

Predstavi kvadrupolno masno spektrometrijo kot univerzalni in potrditveni detektor, sklopljen z GK. Zagotavlja konceptualno osnovo za namensko poglavje o GK-MS, ki sledi.

Uč lekcija 2 • Principi plamensko ionizacijskega detektorja

Pojasnjuje zgorevanje vodik-zrak, zbiranje ionov in skoraj univerzalni odziv FID na organski ogljik. FID je osnovni detektor, s katerim primerjamo vse ostale.

Uč lekcija 3 • Detektorji na zajetje elektronov in dušik-fosfor

Pojasnjuje selektivne ionizacijske mehanizme, ki dajejo ECD in NPD izjemno občutljivost za halogenirane spojine ter spojine, ki vsebujejo dušik ali fosfor. Ključnega pomena za analizo pesticidov in farmacevtskih izdelkov.

Uč lekcija 4 • Delovanje detektorja na toplotno prevodnost

Zajema zasnovo Wheatstonovega mostiča, materiale za filamente in izbiro nosilnega plina za občutljivost TCD. TCD je prednostni detektor za stalne pline in vzorce z visoko koncentracijo.

Uč lekcija 1 • Razvoj kvantitativne metode GK-MS

Zajema izdelavo umeritvene krivulje, izbiro internega standarda in umerjanje z ujemanjem matrike za natančno kvantitativno določanje. Neposredno se navezuje na regulirane analizne metode.

Uč lekcija 2 • Načini zajema: Scan, SIM in MRM

Primerja zajem celotnega spektra (full-scan), spremljanje izbranih ionov (SIM) in spremljanje večih reakcij (MRM) za namene odkrivanja proti kvantitativnemu določanju. Študenti izberejo pravilen način glede na zahteve občutljivosti in selektivnosti.

Uč lekcija 3 • Interpretacija masnih spektrov z elektronsko ionizacijo

Uči pravila fragmentacije, identifikacijo molekulskega iona in prepoznavanje izotopskih vzorcev v EI spektrih. Gradi spektralno pismenost, potrebno za identifikacijo neznanih spojin.

Uč lekcija 4 • Namestitev in nastavitev sistema GK-MS

Zajema zagon vakuumskega sistema, postopke samodejne nastavitve (autotune) in masno kalibracijo z referenčnimi spojinami. Pravilna nastavitev zagotavlja natančno dodeljevanje mas in ponovljivo občutljivost.

Uč lekcija 1 • Primernost sistema in tekoče zagotavljanje kakovosti

Vzpostavlja teste primernosti sistema in tekoče kontrole kakovosti za potrditev delovanja metode med rutinsko uporabo. Povezuje validacijo metode z vsakodnevnimi laboratorijskimi operacijami.

Uč lekcija 2 • Sistematična optimizacija parametrov GK

Uporablja pristope ene spremenljivke naenkrat in načrtovanja eksperimentov za optimizacijo nastavitev kolone, peči in detektorja. Učinkovita optimizacija zmanjša čas razvoja in porabo reagentov.

Uč lekcija 3 • Validacijski parametri in merila sprejemljivosti

Zajema specifičnost, linearnost, točnost, natančnost, LOD, LOQ in robustnost kot ključne validacijske parametre. Študenti določijo znanstveno utemeljena merila sprejemljivosti za vsak parameter.

Uč lekcija 4 • Dokumentacija metode in SOP

Uči strukturirano pisanje metod, oblikovanje SOP in dokumentacijo za nadzor sprememb za GK postopke. Dobro napisani SOP omogočajo dosledno izvajanje pri različnih operaterjih in instrumentih.

Uč lekcija 1 • Težave z obliko vrhov in ločljivostjo

Diagnosticira razvlečenje repa (tailing), frontanje (fronting), razcep vrha in slabo ločljivost s povezovanjem simptomov s specifičnimi vzroki strojne opreme ali metode. Oblika vrha je najvidnejši pokazatelj zdravja sistema GK.

Uč lekcija 2 • Odpravljanje težav z bazno linijo in šumom

Identificira vire visokega šuma, lezenja, konic (spikes) in izločanja kolone s sistematičnim izločanjem. Kakovost bazne linije neposredno vpliva na meje zaznave in natančnost kvantitativnega določanja.

Uč lekcija 3 • Premiki retencijskega časa in neponovljivost

Sledi lezenju retencijskega časa do vzrokov v pretoku, tlaku, temperaturi ali degradaciji kolone. Ponovljivi retencijski časi so bistveni za zanesljivo identifikacijo spojin.

Uč lekcija 4 • Sistematična metodologija odpravljanja težav

Predstavi okvir za analizo temeljnih vzrokov – opazuj, postavi hipotezo, testiraj, preveri – prilagojen za GK instrumentacijo. Strukturiran pristop preprečuje napačne diagnoze in nepotrebno zamenjavo delov.

Uč lekcija 1 • Vzdrževanje injektorja in injektorskega vhoda

Zajema zamenjavo septe, čiščenje ali zamenjavo vložka (liner) in pregled zlatega tesnila kot najpogostejša PM opravila. Vzdrževanje injektorja je najpomembnejši dejavnik za kakovost vrhov.

Uč lekcija 2 • Nega kolone in odločitve o zamenjavi

Vzpostavlja merila za obrezovanje kolone, ponovno kondicioniranje in upokojitev na podlagi meril uspešnosti. Pravočasne odločitve o koloni preprečujejo napake metod in izgubo vzorcev.

Uč lekcija 3 • Filozofija in načrtovanje preventivnega vzdrževanja

Primerja reaktivne in preventivne strategije vzdrževanja ter kvantificira stroške nenačrtovanih izpadov. Študenti izdelajo po tveganju določen urnik PM, usklajen z uporabo instrumenta.

Uč lekcija 4 • Kvalifikacija in kalibracija instrumentov

Zajema protokole za kvalifikacijo namestitve, obratovalno kvalifikacijo in kvalifikacijo delovanja za GK sisteme. Kvalifikacija zagotavlja dokumentiran dokaz, da instrument deluje, kot je predvideno.