Dedika je platforma za učenje skozi prakso: na primer, kako pripraviti poslovno ponudbo, postati manikerka ali uporabljati novo orodje. Ne glede na tvoj cilj, najboljša vsebina o tej temi že obstaja. A pogosto je v tujem jeziku, draga, razpršena po spletu, brez vaj za vadbo ali pa je del predolgega tečaja, ki ni primeren za tiste z natrpanim urnikom. Zato ima Dedika svoj pristop: poiščemo gradivo, kjerkoli je, izberemo tisto, kar je smiselno za tvoj cilj, ga pregledamo s pomočjo strokovnjakov, ki so na voljo za vprašanja, in pripravimo praktične naloge, da se učiš skozi delo. Ti si najpomembnejši na svoji poti in nihče te ne pozna bolje: izberi vsebino in trajanje tečaja, ali boš učil z ali brez interneta in v katerem formatu. Lahko je video, besedilo, avdio ali povzetek. Po tvoji meri, samo s tistim, kar ti ustreza. Tukaj je vsak trenutek tvoje predanosti pomemben in hitreje prideš do bistva.

Tečaji so sestavljeni iz najboljše vsebine na svetu na določeno temo: videi, avdio posnetki, članki in knjige. Vsa ta vsebina je opremljena s povzetki, podcasti (za knjige in članke) ter prepisi (za videe in avdio posnetke). Sami izberete, kako želite vsebino spremljati. Vsako gradivo ima posebna vprašanja za utrjevanje znanja. Poleg tega je tečaj sestavljen iz poglavij, ki jih izberete sami, kar vam omogoča, da se učite le tistega, kar je pomembno za vas. Na koncu vsakega poglavja je praktični projekt, povezan z vašo stroko, kjer lahko vadite naučeno.

Naši tečaji vključujejo povzetek na koncu vsakega poglavja, ki ga lahko prenesete kot PDF in natisnete.

Več kot 2 milijona študentov po vsem svetu

Prisotni v več kot 180 državah

Certifikat veljaven v vaši državi

Domov

...

Tečaj elektroforeze in izolacije produktov

Vsi tečaji

Naravoslovne vede in raziskovanje

Kemija

Tečaj elektroforeze in izolacije produktov

Za vse ravni

Tečaj elektroforeze in izolacije produktov

Obvladaš celoten potek elektroforeze in izolacije izdelkov — od temeljnih načel naboja in migracije do validiranih strategij čiščenja. Ta tečaj opremi laboratorijske znanstvenike in biotehnološke strokovnjake s tehnično poglobljenostjo za samozavestno ločevanje, identifikacijo in pridobivanje bioloških molekul. V enem celovitem programu razviješ strokovnost na področju gelskih sistemov, kapilarnih metod, prenosa western in kromatografske izolacije.

Dedika za podjetja

Kaj se boste naučili:

Obvladaš tehnike agarozne, SDS-PAGE in nativne PAGE elektroforeze za zanesljivo ločevanje nukleinskih kislin in beljakovin.
Uporabiš metode izoelektričnega fokusiranja in kapilarne elektroforeze za doseganje ločb z visoko ločljivostjo na podlagi naboja.
Izvedi postopke izrezovanja gela, elektroeluiranja in čiščenja, da učinkovito pridobiš prečiščene ciljne molekule.
Povežeš elektroforetsko analizo z ionsko izmenjevalno, velikostno izključitveno in afinitetno kromatografijo za nadgradljivo čiščenje.
Načrtuješ in dokumentiraš validacijske študije analiznih metod, ki izpolnjujejo regulativne zahteve in zahteve za nadzor kakovosti.
S strukturiranim diagnostičnim okvirom odpravljaš pogoste napake pri izvedbi gelske elektroforeze, kapilarne elektroforeze, izoelektričnega fokusiranja in izolacijskih postopkov.

Kako praktično študirate Tečaj elektroforeze in izolacije produktov

Kako vadite Tečaj elektroforeze in izolacije produktov

Za vas, ki ste podjetje in želite usposobiti svojo ekipo

Na Dedika za podjetja je tečaj prilagojen z vajami in primeri iz vašega lastnega poslovanja, tako kot vaša podjetja potrebujejo.

Kliknite tukaj

Vsebina tečaja

8 Poglavji • 40 Uč lekcijeTrajanje med 4 in 360 urami (vi se odločite)

Poglavje 1Poglej podrobnosti

Temelji elektroforezne znanosti

Uč lekcija 1 • Načela ionske migracije
Obravnava naboj, električno polje in neto hitrost migracije kot osnovo vsakega elektroforeznega ločevanja. Vzpostavlja izrazoslovje, ki se uporablja skozi ves tečaj.
Uč lekcija 2 • Osnove varnosti in predpisov
Obravnava električne nevarnosti, kemijska tveganja in skladnost z laboratorijskimi varnostnimi standardi. Zagotavlja varno prakso pred začetkom vsakega praktičnega dela.
Uč lekcija 3 • Pregled medijev za ločevanje
Predstavlja gele, kapilare in membrane kot fizikalne matrike, ki uravnavajo migracijo. Zagotavlja kontekst za poglavja o posameznih tehnikah, ki sledijo.
Uč lekcija 4 • Joulovo segrevanje in širjenje pasov
Obravnava nastajanje toplote zaradi električnega toka in njegov vpliv na ločljivost ter ponovljivost. Razumevanje teh omejitev kasneje usmerja izbiro instrumentov in pufrov.
Uč lekcija 5 • Pufri in uravnavanje pH
Pojasnjuje, kako sestava pufra in pH določata stanje naboja analita in kakovost ločevanja. Neposredno podpira izbiro medija in protokola v kasnejših poglavjih.

Poglavje 2Poglej podrobnosti

Tehnike gelske elektroforeze

Uč lekcija 1 • SDS-PAGE za analizo beljakovin
Obravnava denaturacijo z SDS, pripravo poliakrilamidnega gela in določanje molekulske mase. Nadgrajuje znanje o pufrih in pH za doseganje ponovljivega ločevanja beljakovin.
Uč lekcija 2 • Priprava in izvedba agaroznega gela
Uči vlivanje gelov, izbiro odstotka in pogoje elektroforeze za DNA in RNA. Povezuje načela ionske migracije s praktično analizo nukleinskih kislin.
Uč lekcija 3 • Dvodimenzionalna gelska elektroforeza
Združuje izoelektrično fokusiranje s SDS-PAGE za kartiranje proteoma visoke ločljivosti. Zahteva obvladanje obeh gelskih sistemov, obravnavanih prej v tem poglavju.
Uč lekcija 4 • Barvanje gelov in vizualizacija
Predstavlja Coomassiejevo, srebrovo, SYBR in fluorescentne metode barvanja za detekcijo pasov. Izbira barvanja neposredno vpliva na nadaljnje korake kvantifikacije in izolacije.
Uč lekcija 5 • Nativni PAGE in nedenaturirajoči sistemi
Raziskuje ločevanje v nativnih pogojih za ohranitev aktivnosti in konformacije beljakovin. V primerjavi s SDS-PAGE poglablja razumevanje ločevanja na podlagi naboja v primerjavi z ločevanjem na podlagi velikosti.

Poglavje 3Poglej podrobnosti

Izoelektrično fokusiranje in ločevanje na podlagi naboja

Uč lekcija 1 • Teorija izoelektrične točke
Opredeljuje pI in pojasnjuje, kako beljakovine migrirajo do svoje izoelektrične točke v pH gradientu. Tehniko utemeljuje na konceptih ravnotežja naboja iz 1. poglavja.
Uč lekcija 2 • Sistemi IEF z amfoliti kot nosilci
Obravnava pH gradiente, ustvarjene z amfoliti, v formatih cevnih in ploščnih gelov. Predstavlja praktično tvorbo gradientov in izzive glede njihove ponovljivosti.
Uč lekcija 3 • Trakovi z imobiliziranim pH gradientom
Uči izbiro IPG traku, rehidracijo in parametre fokusiranja za robustno IEF. IPG trakovi odpravljajo spremenljivost amfolitov in so standard v proteomskih delovnih procesih.
Uč lekcija 4 • Kapilarno izoelektrično fokusiranje
Predstavlja cIEF kot visoko ločljivo, avtomatizirano alternativo IEF na gelu. Povezuje prej predstavljena načela kapilare s karakterizacijo beljakovin na podlagi naboja.
Uč lekcija 5 • Odpravljanje težav pri rezultatih IEF
Obravnava razvlečenost, slabo fokusiranje in artefakte obarjanja s korektivnimi ukrepi. Gradi diagnostične spretnosti, ki so nujne pred prehodom na delovne procese izolacije produkta.

Poglavje 4Poglej podrobnosti

Metode kapilarne elektroforeze

Uč lekcija 1 • Interpretacija podatkov CE in poročanje
Uči integracijo vrhov, korekcijo migracijskega časa in poročanje o rezultatih za izvedbe CE. Natančna interpretacija podatkov je predpogoj za uporabo CE pri odločitvah o sprostitvi izdelka.
Uč lekcija 2 • Kapilarna gelska elektroforeza za nukleinske kisline
Obravnava kapilare, napolnjene s polimerom, za določanje velikosti fragmentov DNA in oceno čistosti. Neposredno nadomešča metode ploščnih gelov s hitrejšo, kvantitativno avtomatizirano analizo.
Uč lekcija 3 • Osnove kapilarne conske elektroforeze
Pojasnjuje elektroosmotski pretok, cone analita in detekcijo v kapilarah iz taljenega kremena. Razširja teorijo ionske migracije na okolje kapilare v nanolitrskem merilu.
Uč lekcija 4 • Razvoj in validacija CE metode
Usmerja sistematično optimizacijo pufra, napetosti, temperature in parametrov injiciranja. Koncepti validacije zagotavljajo, da CE metode izpolnjujejo regulativne in kakovostne standarde.
Uč lekcija 5 • Micelarna elektrokinetična kromatografija
Predstavlja površinsko aktivne micele kot psevdostacionarno fazo za ločevanje nevtralnih molekul. Širi uporabnost CE onkraj nabitih analitov, obravnavanih v prejšnjih razdelkih.

Poglavje 5Poglej podrobnosti

Tehnike prenosa in odtisa

Uč lekcija 1 • Metode pikčastega in režnega odtisa
Predstavlja hitro nanašanje na membrano brez gela za polkvantitativno detekcijo analitov. Zagotavlja hitrejšo alternativo, kadar ločljivost gela ni potrebna.
Uč lekcija 2 • Prenos Southern in Northern
Uči prenos DNA in RNA, hibridizacijo z označenimi sondami in detekcijo signala. Razširja načela prenosa na tarče nukleinskih kislin za analizo izražanja genov.
Uč lekcija 3 • Delovni proces prenosa Western
Obravnava blokiranje, inkubacijo s primarnimi in sekundarnimi protitelesi ter kemiluminiscenčno detekcijo. Združuje ločevanje SDS-PAGE z imunodetekcijo za identifikacijo beljakovin.
Uč lekcija 4 • Odstranjevanje protiteles z odtisa in ponovno sondiranje
Obravnava protokole za odstranjevanje protiteles z membrane za zaporedno ponovno sondiranje. Poveča količino podatkov iz enega odtisa in zmanjša porabo vzorca.
Uč lekcija 5 • Načela elektroforeznega prenosa
Pojasnjuje, kako električna polja poganjajo beljakovine ali nukleinske kisline iz gela na membrano. Povezuje rezultate gelske elektroforeze s strategijami detekcije na membrani.

Poglavje 6Poglej podrobnosti

Strategije izolacije produkta iz gela

Uč lekcija 1 • Izrezovanje in fragmentacija gela
Uči tehniko s sterilnim skalpelom, rokovanje z rezinami gela in fragmentacijo za učinkovito ekstrakcijo. Pravilno izrezovanje zmanjšuje kontaminacijo in povečuje izkoristek pridobivanja.
Uč lekcija 2 • Elektroeluacija ciljnih molekul
Obravnava naprave za elektroeluacijo in pogoje za učinkovito pridobivanje beljakovin in DNA. Hitrejša in z večjim izkoristkom kot pasivna difuzija za velike ali močno vezane molekule.
Uč lekcija 3 • Čiščenje in koncentriranje izolatov
Obravnava razsoljevanje, ultrafiltracijo in obarjanje za pripravo izolatov za nadaljnjo uporabo. Zagotavlja, da pridobljen material izpolnjuje zahteve glede čistosti in koncentracije.
Uč lekcija 4 • Vizualizacija pasov za izrezovanje
Obravnava UV senčenje, reverzibilno barvanje in fluorescenčne metode, ki ohranjajo integriteto molekul. Izbira prave metode vizualizacije preprečuje poškodbe pred izolacijo.
Uč lekcija 5 • Ekstrakcija s pasivno difuzijo
Pojasnjuje eluacijo molekul iz rezin gela s pasivno difuzijo v združljive pufre. Primerno za nukleinske kisline in majhne beljakovine, kadar je oprema omejena.

Poglavje 7Poglej podrobnosti

Kromatografska izolacija po elektroforezi

Uč lekcija 1 • Uporaba elektroforeze za usmerjanje čiščenja
Uči interpretacijo rezultatov gela in CE za identifikacijo nečistot in izbiro kromatografskih načinov. Povezuje analitično elektroforezo s strategijo preparativne izolacije.
Uč lekcija 2 • Afinitetna kromatografija za zajem tarče
Obravnava vezavo ligand-tarča, strogost spiranja in strategije eluacije za visoko selektiven zajem. Dosega ravni čistosti, ki jih samo z izolacijo na gelu ni mogoče doseči.
Uč lekcija 3 • Spremljanje čistosti med koraki čiščenja
Uporablja analitično gelsko elektroforezo in CE za sledenje čistosti pri vsakem kromatografskem koraku. Sklepa zanko med analitičnimi in preparativnimi delovnimi procesi.
Uč lekcija 4 • Kromatografija z ločevanjem po velikosti
Pojasnjuje molekularno sejanje v poroznih kroglicah za ločevanje na podlagi velikosti in izmenjavo pufra. Dopolnjuje koncepte gelsko sitastega ločevanja in podpira končne korake poliranja.
Uč lekcija 5 • Načela ionske izmenjevalne kromatografije
Obravnava vezavo na podlagi naboja, eluacijo s solnim gradientom in izbiro smole za izolacijo beljakovin. Neposredno uporablja koncepte naboja iz poglavij o IEF in CE na preparativnem merilu.

Poglavje 8Poglej podrobnosti

Kontrola kakovosti in validacija metode

Uč lekcija 1 • Koncepti validacije analitičnih metod
Opredeljuje specifičnost, linearnost, točnost, natančnost in meje zaznavnosti za elektroforezne metode. Vzpostavlja validacijsko izrazoslovje, ki se uporablja v vsem tem poglavju.
Uč lekcija 2 • Dokumentacija in celovitost podatkov
Obravnava standarde laboratorijskih zvezkov, elektronske zapise in zahteve po revizijskih sledeh. Pravilna dokumentacija podpira regulativne vloge in notranje presoje kakovosti.
Uč lekcija 3 • Primernost sistema in kontrole
Obravnava referenčne standarde, pozitivne in negativne kontrole ter teste primernosti sistema. Zagotavlja, da vsaka izvedba izpolnjuje vnaprej določena merila uspešnosti, preden so rezultati sprejeti.
Uč lekcija 4 • Prenos metode in testiranje robustnosti
Usmerja medlaboratorijske študije prenosa in namerno spreminjanje parametrov za oceno robustnosti. Zagotavlja, da metode delujejo dosledno na različnih lokacijah in pri različnih izvajalcih.
Uč lekcija 5 • Gelska denzitometrija in kvantifikacija
Uči zajem slike, odštevanje ozadja in kvantifikacijo pasov z uporabo programske opreme za denzitometrijo. Pretvarja vizualne podatke gela v zanesljive numerične rezultate.

Certifikacija

Vaš veljaven certifikat o zaključku

Ta tečaj je namenjen vam:

Raziskovalni tehnik: pripravljen samozavestno preseči osnovno gelsko elektroforezo.
Analitik za QC v biotehnologiji: potrebuje validirane veščine elektroforeze za regulirana okolja.
Podiplomski študent: gradi temeljit nabor orodij za čiščenje proteinov ali nukleinskih kislin.
Farmaceutski znanstvenik: širi znanje v karakterizacijo bioloških zdravil in testiranje čistosti.
Vodja laboratorija: standardizira postopke ločevanja v rastoči raziskovalni skupini.
Karierni preobratovalec: prehaja v znanosti o življenju s praktičnim usposabljanjem analitičnih tehnik.

Kaj pravijo naši učenci

Vaše predavanja so popolna. Kupil sem enoletni paket in končno imam priložnost spremljati različne teme, ki me zanimajo, ne da bi moral menjati platformo... hvala za vse, kar počnete, že sem vas priporočil drugim ljudem...