Corso di spettrometria di massa

Lezione 1 • Unità, nomenclatura e notazione

Standardizza il vocabolario e le unità utilizzate durante tutto il corso. Previene interpretazioni errate degli spettri e dei valori riportati in letteratura.

Lezione 2 • Storia e ambito della spettrometria di massa

Traccia lo sviluppo della SM dalla fisica ionica iniziale fino alle applicazioni moderne. Stabilisce il contesto del motivo per cui esiste ciascun componente strumentale.

Lezione 3 • Principi fisici fondamentali

Tratta la fisica delle particelle cariche in campi elettrici e magnetici. Fornisce le basi quantitative per comprendere la separazione di massa.

Lezione 1 • Ionizzazione per desorbimento laser assistita da matrice

Insegna la selezione della matrice MALDI, la preparazione del campione e i parametri laser. Collega la ionizzazione pulsata alla compatibilità con l'analizzatore a tempo di volo.

Lezione 2 • Ionizzazione per elettrospray

Spiega il processo di elettrospray per molecole polari, non volatili e di grandi dimensioni. Collega le condizioni di spray alle distribuzioni degli stati di carica osservate negli spettri.

Lezione 3 • Metodi di ionizzazione in fase gassosa

Tratta la ionizzazione elettronica e la ionizzazione chimica per analiti volatili. Collega l'energia di ionizzazione all'estensione della frammentazione e alla complessità spettrale.

Lezione 4 • Sorgenti di ionizzazione a pressione ambiente ed emergenti

Esamina il DESI, il DART e le tecniche di ionizzazione correlate in aria aperta. Evidenzia la preparazione minima del campione come un vantaggio analitico chiave.

Lezione 1 • Analizzatori a tempo di volo

Deriva le equazioni del tempo di volo e spiega il design del reflectron per una risoluzione migliorata. Collega il TOF alla MALDI e alle applicazioni ad alta produttività.

Lezione 2 • Analizzatori Orbitrap e FT-ICR

Spiega l'intrappolamento elettrostatico nell'Orbitrap e l'intrappolamento magnetico nell'FT-ICR. Stabilisce le basi per la misurazione a ultra-alta risoluzione e di massa esatta.

Lezione 3 • Analizzatori a trappola ionica

Tratta l'intrappolamento, l'isolamento e la frammentazione nelle trappole ioniche 3D e lineari. Collega la capacità di accumulo di ioni agli esperimenti MSn introdotti in seguito.

Lezione 4 • Filtri di massa a quadrupolo

Spiega il funzionamento a tensione RF/DC e i diagrammi di stabilità ionica per i quadrupoli. Collega la velocità di scansione e la risoluzione unitaria ai flussi di lavoro quantitativi di routine.

Lezione 1 • Pattern di frammentazione dei gruppi funzionali

Cataloga le perdite caratteristiche e gli ioni frammento per i gruppi funzionali comuni. Consente una rapida generazione di ipotesi strutturali da spettri sconosciuti.

Lezione 2 • Flusso di lavoro per l'elucidazione strutturale de novo

Integra i dati di isotopi, massa esatta e frammentazione in una strategia di elucidazione graduale. Prepara gli studenti ai compiti di identificazione di composti sconosciuti.

Lezione 3 • Pattern isotopici e massa esatta

Spiega le abbondanze isotopiche naturali e il loro effetto sui pattern spettrali. Collega la misurazione della massa esatta alla determinazione della formula molecolare.

Lezione 4 • Lettura e annotazione degli spettri di massa

Insegna l'identificazione dello ione molecolare, del picco base e dei cluster isotopici. Stabilisce un flusso di lavoro di annotazione coerente utilizzato in tutto il corso.

Lezione 1 • Fondamenti di GC-MS e interfaccia

Tratta la selezione della colonna, il gas di trasporto e l'interfaccia capillare diretta alla sorgente ionica. Collega la risoluzione cromatografica alla qualità spettrale e all'affidabilità dell'identificazione.

Lezione 2 • Identificazione qualitativa in SM con trattino

Tratta la ricerca in libreria, la corrispondenza del tempo di ritenzione e il punteggio spettrale per l'identificazione dei composti. Stabilisce i criteri di affidabilità dell'identificazione utilizzati nei flussi di lavoro regolamentati.

Lezione 3 • Risoluzione dei problemi dei sistemi SM con trattino

Diagnostica i problemi prestazionali cromatografici e di SM comuni nei sistemi accoppiati. Costruisce abilità pratiche di manutenzione essenziali per la produttività del laboratorio.

Lezione 4 • Tecnologie di interfaccia LC-MS

Spiega le interfacce ESI e APCI per l'accoppiamento di colonne a fase inversa e HILIC alla SM. Affronta la compatibilità della fase mobile e le sfide della soppressione ionica.

Lezione 1 • Progettazione del flusso di lavoro SRM e MRM

Guida la selezione delle transizioni, l'ottimizzazione dell'energia di collisione e il bilanciamento del dwell time per l'MRM. Produce un metodo quantitativo completo pronto per la validazione.

Lezione 2 • Parametri di validazione del metodo

Tratta accuratezza, precisione, LOD, LOQ, selettività e stabilità come parametri di validazione. Allinea la progettazione della validazione alle linee guida bioanalitiche riconosciute a livello internazionale.

Lezione 3 • Strategie di calibrazione e adattamento della curva

Insegna la calibrazione esterna, la calibrazione con matrice e la regressione pesata. Collega la progettazione della calibrazione all'accuratezza nell'intervallo dinamico.

Lezione 4 • Standard interni e diluizione isotopica

Tratta gli standard interni marcati con isotopi stabili e la teoria della diluizione isotopica in SM. Dimostra come gli standard interni correggano gli effetti matrice e la variabilità del recupero.

Lezione 1 • Frammentazione peptidica e ioni sequenza

Spiega le serie di ioni b e y, gli ioni a e le perdite neutre dalla scissione dello scheletro peptidico. Consente la validazione manuale delle identificazioni peptidiche automatizzate.

Lezione 2 • Flusso di lavoro della proteomica bottom-up

Insegna l'acquisizione dati LC-MS/MS, la ricerca in database e il peptide-spectrum matching. Collega le identificazioni peptidiche all'inferenza proteica e al controllo dei falsi positivi.

Lezione 3 • Strategie di proteomica quantitativa

Tratta gli approcci di quantificazione label-free, SILAC, TMT e iTRAQ. Collega la strategia di quantificazione al disegno sperimentale e alla potenza statistica.

Lezione 4 • SM top-down e nativa delle proteine

Introduce l'analisi di proteine intatte, la SM nativa e la caratterizzazione di complessi proteici in fase gassosa. Estende le competenze proteomiche a quesiti di biologia strutturale e dei sistemi.

Lezione 1 • Spettrometria di mobilità ionica accoppiata alla SM

Spiega i principi di separazione a tubo di deriva, a onda progressiva e a mobilità ionica intrappolata. Aggiunge una dimensione di sezione d'urto ai flussi di lavoro di caratterizzazione strutturale.

Lezione 2 • Spettrometria di massa per imaging

Insegna MALDI-MSI, DESI-MSI e SIMS per la mappatura molecolare spazialmente risolta di tessuti. Collega gli spettri a livello di pixel all'interpretazione istologica e farmacologica.

Lezione 3 • Metabolomica e lipidomica mediante SM

Tratta flussi di lavoro di metabolomica untargeted e targeted, annotazione delle classi lipidiche e mappatura dei pathway. Integra i dati SM con strumenti bioinformatici per l'interpretazione biologica.

Lezione 4 • Applicazioni SM per l'ambiente e la sicurezza alimentare

Applica SM ad alta risoluzione e metodi multi-residuo allo screening di contaminanti in matrici complesse. Dimostra flussi di lavoro di reporting allineati alle normative e di screening di sospetti.