Corso sul Test Genetico Preimpianto (PGT)

Lezione 1 • Quadro Normativo ed Etico

Esamina i modelli di supervisione internazionali, i requisiti di accreditamento e i principi etici che regolano la PGT. Prepara i clinici a operare all'interno di strutture conformi ed eticamente solide.

Lezione 2 • Panoramica della Procreazione Medicalmente Assistita

Riassume le fasi di stimolazione, fecondazione e coltura embrionaria nella FIV. Contestualizza dove la PGT si integra nel ciclo clinico di PMA.

Lezione 3 • Elementi Essenziali di Genetica per i Clinici della PGT

Tratta la struttura cromosomica, l'ereditarietà mendeliana e i tipi di mutazioni rilevanti per la PGT. Fornisce il vocabolario genetico necessario per l'intero corso.

Lezione 4 • Storia ed Evoluzione della PGT

Traccia il percorso della PGT dall'analisi del globulo polare alle piattaforme di sequenziamento di nuova generazione. Illustra come i progressi tecnologici hanno plasmato la pratica clinica attuale.

Lezione 1 • Metodi di Apertura della Zona Pellucida

Descrive in dettaglio le tecniche di perforazione meccanica, chimica e laser-assistita della zona. Collega la qualità dell'apertura della zona al successo della biopsia a valle e alla vitalità dell'embrione.

Lezione 2 • Metriche di Qualità della Biopsia e Risoluzione dei Problemi

Definisce gli indicatori chiave di prestazione per il successo della biopsia, inclusi i tassi di fallimento dell'amplificazione e di assenza di risultato. Guida la risoluzione sistematica degli errori procedurali e di laboratorio.

Lezione 3 • Procedura di Biopsia del Trofectoderma

Fornisce una guida passo-passo per l'aspirazione e l'escissione delle cellule del trofectoderma. Sottolinea il numero di cellule, la vitalità e l'evitamento della contaminazione.

Lezione 4 • Fasi della Biopsia Embrionaria e Motivazioni

Confronta gli approcci di biopsia del globulo polare, allo stadio di segmentazione e della blastocisti. Stabilisce le motivazioni cliniche e biologiche per la scelta dello stadio.

Lezione 1 • Piattaforme di Sequenziamento Utilizzate nella PGT

Esamina le tecnologie di sequenziamento a lettura breve e lunga applicabili ai flussi di lavoro della PGT. Evidenzia i compromessi tra throughput, costo e risoluzione per l'uso clinico.

Lezione 2 • Sfide della Genomica su Singola Cellula

Spiega l'allele dropout, il bias di amplificazione e i rischi di contaminazione specifici del DNA di singola cellula. Inquadra il motivo per cui la fedeltà della WGA è critica per l'accuratezza diagnostica.

Lezione 3 • Fondamenti della Pipeline Bioinformatica

Introduce le pipeline di allineamento delle letture, chiamata del numero di copie e filtraggio delle varianti. Fornisce l'alfabetizzazione computazionale necessaria per interpretare gli output dei software di PGT.

Lezione 4 • Metodi WGA e Prestazioni Comparative

Confronta DOP-PCR, MDA e MALBAC in termini di uniformità di copertura e tassi di errore. Consente una scelta informata della piattaforma WGA per ciascuna applicazione di PGT.

Lezione 1 • Aneuploidia Cromosomica negli Embrioni Umani

Descrive la prevalenza, i tipi e la relazione con l'età materna dell'aneuploidia embrionaria. Stabilisce il carico clinico che la PGT-A mira a ridurre.

Lezione 2 • Piattaforme Array CGH e SNP Array

Spiega le metodologie di ibridazione genomica comparativa su array e SNP array per lo screening dei 24 cromosomi. Confronta risoluzione, rilevamento dell'origine parentale e identificazione della UPD.

Lezione 3 • Rilevamento dell'Aneuploidia Basato su NGS

Tratta l'analisi del numero di copie mediante NGS a bassa copertura per aneuploidie di interi cromosomi e segmentali. Affronta i limiti di risoluzione e le soglie di significatività clinica.

Lezione 4 • Mosaicismo nella PGT-A: Rilevamento e Reporting

Affronta le basi biologiche, le soglie di rilevamento e le categorie di refertazione per gli embrioni a mosaico. Guida i clinici nel counseling alla paziente sulle decisioni relative al trasferimento di embrioni a mosaico.

Lezione 1 • Interpretazione del Risultato e Refertazione della PGT-M

Guida l'interpretazione dei dati aplotipici e mutazionali per classificare gli embrioni come affetti, portatori o non affetti. Tratta gli standard di refertazione e la comunicazione con la paziente.

Lezione 2 • Basi Genetiche delle Malattie Monogeniche

Esamina i modelli di trasmissione autosomica dominante, recessiva, X-linked e le mutazioni de novo rilevanti per la PGT-M. Costruisce la base di conoscenze specifiche per malattia necessaria alla progettazione del protocollo.

Lezione 3 • Metodi di Rilevamento Diretto della Mutazione

Tratta gli approcci basati su PCR, NGS e Karyomapping per il rilevamento diretto delle varianti. Confronta sensibilità, specificità e strategie di mitigazione dell'ADO.

Lezione 4 • Workup e Analisi del Proposito

Descrive il workup genetico pre-ciclo che include il sequenziamento del proposito, gli studi familiari e la conferma della variante. Un workup accurato previene errori di progettazione del protocollo.

Lezione 5 • Aplotipizzazione e Analisi di Linkage

Spiega l'aplotipizzazione basata su SNP per tracciare gli alleli malattia e ridurre il rischio di allele dropout. L'aplotipizzazione è il cardine di una progettazione robusta del protocollo di PGT-M.

Lezione 1 • Interpretazione del Referto PGT-SR e Counseling

Addestra i clinici a classificare gli embrioni come bilanciati, sbilanciati o normali e a comunicare le raccomandazioni per il trasferimento. Affronta il rischio residuo di stato di portatore bilanciato.

Lezione 2 • Workup Citogenetico per la PGT-SR

Descrive in dettaglio i requisiti di cariotipo, mappatura FISH e caratterizzazione dei breakpoint necessari prima della progettazione della PGT-SR. Dati accurati sui breakpoint sono essenziali per la selezione di sonde e pannelli.

Lezione 3 • Tipi di Riarrangiamenti Cromosomici Strutturali

Classifica le traslocazioni reciproche, le traslocazioni Robertsoniane, le inversioni e le inserzioni. Stabilisce le basi citogenetiche per la progettazione del protocollo di PGT-SR.

Lezione 4 • Piattaforme NGS e Array per PGT-SR

Confronta gli approcci FISH, array CGH e NGS per rilevare riarrangiamenti sbilanciati negli embrioni. Affronta i limiti di risoluzione per piccoli sbilanciamenti vicino ai breakpoint.

Lezione 1 • Prevenzione e Controllo della Contaminazione

Descrive in dettaglio i controlli fisici, procedurali e molecolari per prevenire la contaminazione da DNA esogeno. La contaminazione è la principale causa di diagnosi errata nella PGT.

Lezione 2 • Validazione e Verifica del Saggio

Definisce i parametri di validazione analitica per i saggi di PGT, inclusi sensibilità, specificità e riproducibilità. I dati di validazione sono necessari prima dell'implementazione clinica.

Lezione 3 • Sistemi di Gestione Qualità nei Laboratori PGT

Introduce i principi di gestione qualità basati su ISO applicati alle operazioni del laboratorio PGT. Fornisce il quadro strutturale per tutte le successive attività di CQ.

Lezione 4 • Programmi di Valutazione Esterna della Qualità

Tratta la partecipazione ai test di competenza e agli schemi di valutazione esterna della qualità per la PGT. Le soglie di prestazione della VEQ sono richieste per il mantenimento dell'accreditamento.

Lezione 1 • Processo Decisionale per il Trasferimento Embrionario

Applica i risultati genetici insieme ai dati morfologici e clinici per selezionare l'embrione ottimale per il trasferimento. Integra i risultati di PGT-A, PGT-M e PGT-SR nei casi combinati.

Lezione 2 • Counseling Genetico Pre-Ciclo

Struttura la consultazione di counseling genetico per stabilire il consenso informato e aspettative realistiche. Un counseling efficace riduce l'ansia della paziente e migliora la compliance.

Lezione 3 • Monitoraggio degli Esiti e Reporting dei Dati

Stabilisce gli indicatori chiave di prestazione per gli esiti del ciclo di PGT, inclusi i tassi di gravidanza clinica, aborto spontaneo e nati vivi. I dati sugli esiti guidano il miglioramento continuo del programma.

Lezione 4 • Follow-up Post-Trasferimento e Conferma Prenatale

Coordina i test diagnostici prenatali per confermare i risultati della PGT e gestire risultati inattesi. Chiude il ciclo clinico e supporta l'assistenza continua alla paziente.