Curso de Teste de PCR

Aula 1 • Eliminação de Resíduos Químicos e Biológicos

Abrange a segregação, identificação e eliminação de reagentes de PCR e amostras biológicas. Relaciona o manuseamento correto de resíduos com a conformidade regulamentar e a proteção ambiental.

Aula 2 • Protocolos de Equipamento de Proteção Individual

Detalha a colocação, remoção e eliminação corretas de luvas, batas, máscaras e proteção ocular. Reforça a prevenção da contaminação como pré-requisito para resultados de PCR válidos.

Aula 3 • Níveis de Biossegurança e Classificação de Risco

Define os níveis de biossegurança e associa os grupos de risco de agentes patogénicos aos requisitos de contenção adequados. Fornece a base de segurança para todas as atividades laboratoriais subsequentes.

Aula 1 • Reagentes Chave e as suas Funções

Identifica os componentes essenciais da PCR, incluindo a ADN polimerase, os iniciadores, os dNTPs e o tampão. Os formandos aprendem como cada reagente contribui para a fidelidade e o rendimento da reação.

Aula 2 • Variantes de PCR e Visão Geral das Aplicações

Abrange os principais formatos de PCR, incluindo RT-PCR, qPCR e PCR multiplex. Posiciona cada variante no seu contexto de diagnóstico ou investigação para capítulos posteriores.

Aula 3 • Estrutura do ADN e Fundamentos da Replicação

Abrange a composição dos nucleótidos, o emparelhamento de bases e o modelo de dupla hélice como pré-requisitos para a lógica da PCR. Estabelece o vocabulário molecular utilizado ao longo do capítulo.

Aula 1 • Receção de Amostras e Processamento Pré-Analítico

Detalha os procedimentos de receção laboratorial, incluindo inspeção visual, critérios de rejeição e registo de entrada. Relaciona as etapas pré-analíticas com a qualidade da extração e amplificação a jusante.

Aula 2 • Transporte de Amostras e Cadeia de Frio

Abrange os requisitos de temperatura, normas de embalagem e prazos de transporte para amostras de PCR. Mantém a qualidade pré-analítica que afeta diretamente o desempenho da amplificação a jusante.

Aula 3 • Tipos de Amostras e Locais de Colheita

Descreve os tipos de amostras nasofaríngeas, orofaríngeas, salivares e outras utilizadas no diagnóstico por PCR. Explica como o local de colheita afeta a carga viral e a exatidão dos resultados.

Aula 1 • Avaliação da Qualidade dos Ácidos Nucleicos

Ensina a quantificação espectrofotométrica e fluorométrica de ácido nucleico extraído. As métricas de qualidade orientam as decisões de diluição e preveem a eficiência da amplificação por PCR.

Aula 2 • Princípios da Extração de Ácidos Nucleicos

Explica a lise celular, a ligação de ácidos nucleicos, a lavagem e a eluição como etapas universais de extração. Estabelece o quadro conceptual aplicado a todos os métodos manuais e automatizados.

Aula 3 • Resolução de Problemas na Extração

Identifica falhas comuns na extração, incluindo baixo rendimento, degradação e inibição. A resolução sistemática de problemas restaura o desempenho da extração e protege a validade dos resultados.

Aula 4 • Plataformas de Extração Automatizadas

Apresenta extratores automatizados de alto débito, a sua programação e requisitos de manutenção. A automatização reduz o erro manual e aumenta o débito para testes de PCR de alto volume.

Aula 1 • Programação e Operação do Ciclador Térmico

Detalha como programar parâmetros do ciclo, incluindo temperatura, tempo e taxas de rampa. A programação correta determina diretamente a eficiência da amplificação e a especificidade do produto.

Aula 2 • Preparação dos Componentes da Reação

Abrange a descongelação, agitação em vórtex e centrifugação dos reagentes antes da preparação da mistura-mãe. A preparação adequada previne erros de pipetagem e garante condições de reação consistentes.

Aula 3 • Técnicas de Carregamento de Placas e Tubos

Abrange o planeamento sistemático da disposição das amostras, a colocação de controlos positivos e negativos e os métodos de selagem. O carregamento organizado previne a contaminação cruzada e apoia a interpretação precisa dos dados.

Aula 4 • Monitorização e Conclusão da Série Analítica

Ensina a monitorização em tempo real das curvas de amplificação e dos alertas do instrumento durante uma série analítica. A intervenção atempada durante a série analítica previne o desperdício de reagentes e resultados inválidos.

Aula 1 • Compreensão dos Valores de Ct e Curvas de Amplificação

Explica os valores de ciclo limiar, as fases da curva sigmoide e a sua relação com a quantidade alvo. A interpretação do Ct é a competência principal para determinar resultados positivos, negativos e indeterminados.

Aula 2 • Geração de Relatórios e Comunicação de Resultados

Ensina a formatação estruturada de relatórios, a codificação de resultados e a transmissão segura aos profissionais requisitantes. O reporte preciso fecha o ciclo de diagnóstico e apoia a tomada de decisão clínica.

Aula 3 • Avaliação do Desempenho dos Controlos

Abrange a interpretação dos controlos positivos, negativos e de extração interna dentro de cada série analítica. As falhas dos controlos invalidam a série analítica e desencadeiam fluxos de trabalho de ação corretiva definidos.

Aula 4 • Classificações Positivas, Negativas e Indeterminadas

Define as categorias de resultados usando critérios de corte específicos do ensaio e o desempenho dos controlos. Os formandos aplicam regras de decisão de forma consistente para minimizar erros de classificação.

Aula 1 • Não Conformidade e Análise de Causa Raiz

Abrange a identificação, documentação e resolução de eventos não conformes em testes de PCR. A análise de causa raiz previne a recorrência e demonstra melhoria contínua aos organismos de acreditação.

Aula 2 • Planear um Plano de CQ para PCR

Orienta os formandos na seleção de materiais de controlo, definição de critérios de aceitação e agendamento de séries analíticas de CQ. Um plano de CQ estruturado deteta erros sistemáticos antes de afetarem os resultados dos doentes.

Aula 3 • Cartas de Levey-Jennings e Análise de Tendências

Ensina a construção e interpretação de cartas de Levey-Jennings para detetar desvios e tendências. A análise visual de tendências permite a deteção precoce de degradação de reagentes ou deriva do instrumento.

Aula 4 • Fundamentos do Controlo de Qualidade

Define a exatidão analítica, a precisão analítica, a sensibilidade analítica e a especificidade analítica como métricas principais de CQ para ensaios de PCR. Estas métricas formam a base para avaliar o desempenho do ensaio em todas as atividades de CQ subsequentes.

Aula 1 • Validação e Verificação de Ensaios

Abrange os parâmetros de validação de métodos, incluindo exatidão analítica, precisão analítica e testes de interferência analítica. Os dados de validação demonstram a adequação do ensaio para uso clínico e satisfazem os requisitos de submissão regulamentar.

Aula 2 • Otimização da PCR Quantitativa em Tempo Real

Abrange a construção da curva padrão, o cálculo da eficiência e a avaliação da gama dinâmica para qPCR. A qPCR otimizada fornece uma quantificação precisa essencial para a monitorização da carga viral.

Aula 3 • Estrutura Sistemática de Resolução de Problemas em PCR

Fornece uma abordagem estruturada para diagnosticar falsos positivos, falsos negativos e inibição. A resolução sistemática de problemas reduz o tempo de resolução e protege a exatidão do diagnóstico.

Aula 4 • Princípios e Aplicações da PCR Digital

Apresenta a PCR digital em gotículas e em chip para quantificação absoluta sem curva padrão. A PCR digital é aplicada à deteção de alvos de baixa abundância e variantes raras.