Curso de Técnico em Cromatografia

Aula 1 • O Modelo da Coluna Cromatográfica

Apresenta pratos teóricos, a equação de van Deemter e fontes de alargamento de banda. Os alunos utilizam estes modelos para prever e diagnosticar o desempenho da coluna.

Aula 2 • Princípios Termodinâmicos Fundamentais

Aborda os equilíbrios de partição, os coeficientes de distribuição e a energia livre de Gibbs de transferência. Liga a termodinâmica ao comportamento prático de retenção observado no laboratório.

Aula 3 • Noções Básicas de Interpretação de Cromatogramas

Ensina a identificação de picos, o tempo de retenção e a quantificação básica a partir de um cromatograma. Estabelece o vocabulário utilizado ao longo de todo o curso.

Aula 4 • Interações entre Fase Estacionária e Móvel

Examina a polaridade, as pontes de hidrogénio e as forças de van der Waals que governam a retenção do analito. Fornece a base química para a escolha das fases em capítulos técnicos posteriores.

Aula 1 • Utilização de Equipamento de Proteção Individual

Especifica a seleção correta de EPI para luvas, proteção ocular e riscos respiratórios em cromatografia. Reforça que a escolha do EPI depende do produto químico e da tarefa específicos.

Aula 2 • Fundamentos de Boas Práticas Laboratoriais

Apresenta os princípios das BPL: rastreabilidade, integridade dos dados brutos e documentação controlada. Os alunos compreendem como as BPL sustentam a aceitação regulamentar dos resultados analíticos.

Aula 3 • Reconhecimento de Perigos Químicos

Aborda os pictogramas GHS, as fichas de dados de segurança e as classes de perigo comuns em laboratórios de cromatografia. Prepara os alunos para avaliar o risco antes de manusear solventes e reagentes.

Aula 4 • Ergonomia e Organização Laboratorial

Aborda a organização do posto de trabalho, a prevenção de lesões por esforço repetitivo e os protocolos de limpeza no final do dia. Uma boa organização reduz diretamente a contaminação e o tempo de inatividade dos instrumentos.

Aula 1 • Seleção da Fase Móvel para CCF

Ensina o ajuste da força do solvente e a série eluotrópica para o desenvolvimento da fase móvel em CCF. Os alunos otimizam os valores de Rf através de um rastreio sistemático de solventes.

Aula 2 • Cálculo de Rf e Interpretação de Resultados

Ensina a medição do Rf, a notação hRf e a comparação com padrões de referência para identificação. Os alunos documentam e interpretam os resultados de CCF num formato em conformidade com as BPL.

Aula 3 • Métodos de Visualização e Deteção

Apresenta a luz UV, o vapor de iodo e os reagentes de pulverização química para visualização de manchas. A escolha do método de deteção depende dos grupos funcionais do analito.

Aula 4 • Placas de CCF e Fases Estacionárias

Descreve as placas de CCF de sílica gel, alumina e fase reversa e as suas aplicações adequadas. A seleção da placa determina diretamente a seletividade da separação.

Aula 1 • Técnicas e Modos de Injeção

Aborda a injeção split, splitless e on-column com casos de uso adequados para cada modo. A técnica de injeção afeta criticamente a forma do pico e a exatidão quantitativa.

Aula 2 • Arquitetura do Instrumento de CG

Mapeia o percurso do fluxo desde o fornecimento de gás de arraste até ao injetor, forno da coluna e detetor. Compreender a disposição do instrumento é um pré-requisito para uma operação segura e eficaz.

Aula 3 • Colunas de CG e Fases Estacionárias

Compara colunas empacotadas e capilares, fases de polaridade e efeitos da espessura do filme na separação. A seleção da coluna determina a resolução e a velocidade de análise.

Aula 4 • Estratégias de Programação de Temperatura

Ensina corridas isotérmicas vs. programadas e o seu efeito na resolução e no tempo de corrida. Os alunos concebem programas de temperatura para separar misturas complexas de forma eficiente.

Aula 5 • Desenvolvimento e Resolução de Problemas de Métodos de CG

Guia a otimização sistemática do fluxo de gás de arraste, temperatura e parâmetros de injeção. Os alunos diagnosticam caudas de pico, picos fantasmas e deriva da linha de base a partir de cromatogramas reais.

Aula 1 • Fundamentos de HPLC de Fase Reversa

Aborda as fases estacionárias C18 e C8, as fases móveis aquoso-orgânicas e os mecanismos de retenção. A fase reversa é o modo de HPLC dominante que os alunos encontrarão na prática.

Aula 2 • Técnicas de Eluição em Gradiente

Ensina a programação de gradientes, os efeitos do volume de espera e os requisitos de reequilíbrio. Os métodos de gradiente resolvem amostras com uma vasta gama de polaridades que as corridas isocráticas não conseguem processar.

Aula 3 • Componentes do Sistema HPLC e Percurso do Fluxo

Identifica bombas, degaseificadores, injetores, colunas e detetores e traça o fluxo da fase móvel. A compreensão do sistema previne fugas, falhas de pressão e contaminação.

Aula 4 • Deteção UV-Vis e de Matriz de Díodos

Explica os princípios de absorvância UV, seleção de comprimento de onda e confirmação espectral com DAD. As definições de deteção afetam diretamente a sensibilidade analítica e a avaliação da pureza do pico.

Aula 5 • Resolução de Problemas e Manutenção em HPLC

Aborda contrapressão elevada, picos fantasmas, deriva do tempo de retenção e falhas dos selos da bomba. Os calendários de manutenção preventiva prolongam significativamente a vida útil da coluna e do instrumento.

Aula 1 • Método do Padrão Interno

Explica os critérios de seleção do padrão interno, o cálculo do fator de resposta e a correção da variabilidade da injeção. Os métodos de PI melhoram a precisão quando ocorrem perdas na preparação da amostra.

Aula 2 • Incerteza de Medição e Reporte

Apresenta as fontes de incerteza, as regras de propagação e a expressão de resultados com intervalos de confiança. O reporte adequado da incerteza é exigido pelos organismos de acreditação e regulamentares.

Aula 3 • Quantificação com Padrão Externo

Ensina métodos de padrão externo de ponto único e multiponto com sequências de injeção intercaladas. Os alunos compreendem quando os efeitos de matriz limitam a exatidão do padrão externo.

Aula 4 • Construção da Curva de Calibração

Aborda a calibração multiponto, a regressão linear e a avaliação do R² para dados cromatográficos. Uma curva de calibração válida é a base de todos os resultados quantitativos.

Aula 1 • Documentação e Relatórios de Validação

Estrutura um relatório de validação completo, incluindo protocolo, dados brutos, resumos estatísticos e conclusões. A documentação deve satisfazer tanto os SOP internos como a revisão regulamentar externa.

Aula 2 • Testes de Robustez e Rugosidade

Aplica os planos de Plackett-Burman para identificar os parâmetros do método mais sensíveis a pequenas alterações. Os métodos robustos têm um desempenho fiável em diferentes operadores, instrumentos e lotes de reagentes.

Aula 3 • Limite de Deteção e de Quantificação

Aborda as abordagens baseadas na relação sinal-ruído, no branco e na calibração para a determinação do LOD e LOQ. Os alunos selecionam a abordagem adequada para a sua matriz e contexto regulamentar.

Aula 4 • Visão Geral dos Parâmetros de Validação

Define especificidade analítica, linearidade, exatidão, precisão, LOD, LOQ e robustez como parâmetros de validação fundamentais. Cada parâmetro responde a uma questão específica sobre a adequação do método ao objetivo.

Aula 5 • Estudos de Exatidão e Precisão

Concebe experiências de recuperação de fortificação e estudos de precisão interdia para demonstrar a exatidão do método. Ferramentas estatísticas, incluindo RSD e testes t, avaliam se os resultados cumprem os critérios de aceitação.

Aula 1 • Cromatografia Iónica para Analitos Iónicos

Aborda a deteção por condutividade suprimida, colunas de troca aniónica e catiónica e geração de eluente. A cromatografia iónica é a técnica principal para iões inorgânicos e pequenos ácidos orgânicos.

Aula 2 • Operação de CG-MS e Interpretação Espetral

Ensina a conceção da interface CG-MS, a pesquisa em bibliotecas e a interpretação de padrões de fragmentação. Os alunos confirmam a identidade do composto e detetam interferências analíticas de co-elução usando espetros de massa.

Aula 3 • Visão Geral da Cromatografia com Fluido Supercrítico

Apresenta fases móveis à base de CO2, adição de modificador e vantagens da SFC para analitos quirais e lipofílicos. A SFC combina a velocidade da CG com a versatilidade da HPLC para classes específicas de compostos.

Aula 4 • Princípios de LC-MS e LC-MS/MS

Explica as interfaces ESI e APCI, a supressão de matriz e as transições MRM para quantificação direcionada. A LC-MS/MS é o padrão de referência para análise a nível de vestígios em matrizes biológicas complexas.